次に、多層フラスコを時計回りに傾け、引き続き残った培地をすべて吸引します。 コツ：吸引法には2mLもしくは10mLのプラスチックピペットを使用します。２．デカント法：NESTロゴを手前に向けて多層フラスコから培地を注ぎだします。細胞の回収法１．バッファーで1回リンスし、細胞剥離液（≧5mL/レイヤー）を加えた後、液を培養面にいきわたらせます。（注入法 4および5を参照）２．不活化試薬を加えた後（注入法 3, 4および5を参照）、軽くゆらし、細胞を完全にはがします。３．上記の吸引法の手順にしたがって10mLプラスチックピペットを用いて細胞懸濁液を回収します。もしくはデカント法の手順に従って、細胞懸濁液をコニ870870203×120×80プラグシールTC処理済電子203×120×80ベントフィルターTC処理済電子◆ 透明性の高い100%ヴァージンポリスチレン製◆ 培養面積：870cm2◆ 個別包装細胞懸濁液の注入法１．細胞の培地への懸濁：細胞懸濁液を容器で調整します。１層あたり30～50mLが推奨量です。２．多層フラスコへプラスチックピペットを用いて細胞懸濁液を注入：泡や気泡の発生を防ぐため、フラスコの傾斜を利用して注ぎ入れます。（毎回少量を・オートクレーブ不可・DNase, RNase, Pyrogen Free・電子線滅菌、SAL=10-6・材質：P.S（キャップはP.P）フラスコ本体は、P.78～80をご参照ください。容量（推奨）(mL)培養面積(cm2)150～250150～250寸法(mm)キャップ仕様包装希望販売価格滅菌8個（1個個装×8パック）¥19,700滅菌8個（1個個装×8パック）¥19,70068カタログNo.WNB731001個装WNB731002個装使用方法ピペット内に残します。）【図①】 コツ：10mLピペットの場合、フラスコの底まで到達することができますが、25mLピペットの場合、NESTのロゴ辺りまでしか入れることができません。３．平らなベンチ上で多層フラスコをロゴが手前になるように立てます。フラスコを時計回りに45°傾けて細胞懸濁液を各層にいきわたらせます。【図②】４．フラスコを45°に傾けたまま、ロゴが上になるように平らなベンチの上に静かに倒します。【図③】５．フラスコを倒したらフラスコを静かに前後左右に揺らし、培養面に細胞懸濁液をいきわたらせます。 コツ：泡や気泡の発生に注意してください。細胞懸濁液が他の層にあふれ出さないように注意してください。６．フラスコをインキュベーターに移します。培地の除去法１．吸引法：培地を吸引または除去するには、NESTロゴを手前に向けた状態で多層フラスコを反時計回りで45°に傾け吸引します【図④】。カルチューブに回収します。４．必要があれば、フラスコ内を再度リンスし、残った細胞を回収します。５．詳細はYouTubeの「NEST Multi-layer Flask」の動画（@nestwuxi4075）を参照ください。5層細胞培養フラスコ
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