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ACBD6CellStream フローサイトメーターを用いてデータを取得後、細菌を定量し、図1に示すゲーティング戦略で生存率を評価しました。まず、前方散乱光（FSC）と側方散乱光（SSC）の二変量解析により、散乱光の値が小さい細菌（'FSC/SSC low'）と、濃度キャリブレーション用の標準微粒子ビーズを各々ゲーティングしました（図1.A）。つづいて、FSC/SSC lowの集団から核酸染色SYTO 9の陽性細菌（SYTO 9+)をヒストグラムを用いて選択しました（図1.B）。そして、個々の細菌を分析するためにSYTO 9の蛍光強度とAspect ratioの二変量解析を用いてSYTO 9陽性集団に対してダブレット除去を行いました（図1.C）。Aspect ratioは、CCDカメラで測定されたイベントのwidth値をhight値で除した値であり、単一の丸い細菌はAspect ratioが1に近い細胞であるため他の細胞と識別することができます。シングレット集団の生存率をSYTO 9とPIの二変量解析をもとに評価し、'live' and 'dead' ゲートをかけて生菌と死菌を区別します（図1.D）。図1. 細菌の計数および生存率のゲーティングの結果です。はじめにFSC/SSC値が小さい細菌と標準微粒子ビーズをゲーティングしました（A）。つづいて、核酸染色試薬SYTO 9を用いて全細菌を選択し（B）、Aspect ratioの値をもとにダブレット除去を行ないました（C）。生死判別はSYTO 9とPIによる蛍光強度（D）を用いて行いました。 図1結果vol.167